用多管发酵技术寻找大肠菌群
理论:
水中有许多细菌。其中大多数是完全无害的(非致病),少数是有害的(致病),可引起伤寒、发烧、副伤寒、痢疾和霍乱等疾病。很深的地下水不含这些细菌。卫生工程师并不关心所有的问题。大肠菌群是最重要的类型之一,包括aero基因,杂技Cloace,大肠杆菌。因此,大肠菌群可以部分地定义为包括所有需氧和兼性绿色非孢子杆菌,它们在3.5℃条件下48小时内形成甲酸泻盐并生成气体。大肠菌群本身是无害的细菌。但它们并不表明水质受到细菌污染,但也因为它们的有无和数量可以通过常规实验室测试确定。
大肠菌群的数目可通过下列测试查出:
- 倒板总量法
- 膜过滤法
- 多管发酵法
最后一种方法是基于大肠菌群发酵乳糖与气体形成。将适量待测水置于含有乳糖的无菌试管中。试管孵育24小时,然后检查是否有气体,并记录下来。如果24小时内没有形成气体,则等待48小时。如果形成了气体,那么大肠菌群就被证实了。为了从这种方法中得到大肠菌群的数量,如果注意到样品的不同大小,则将静力学定律应用到试验结果中,得到水中大肠菌群的最可能数量(MPN)。为此目的,我们提供了最可靠的数字图表。
WHO大肠菌群指南值
根据世界卫生组织的说法,根据水中大肠菌群的数量,水被分为以下几类。
类 | 状态 | 大肠杆菌每100毫升 |
01 | 优秀的 | 0 |
02 | 令人满意的 | 1-3 |
03 | 可疑的 | 4到10 |
仪器:
发酵管,达勒姆管,棉,烧杯,高压釜(蒸汽灭菌器)和吸管过滤器。
化学成分:
水样,乳糖,金银溶液。
程序:
这项测试分三个阶段进行:我们将自己限制在第一阶段(推定测试),将在以下步骤中执行。
取15个试管,做成3种,每一种有5个试管
用10ml乳糖汤溶液填满每一个
将Durham,S管倒置在所有测试管中,它们轻轻地摇动以除去空气.
用棉花堵塞所有TES管
将所有试管在121℃下“在高压釜中进行分钟。
灭菌后取出管,管子被冷却
分别在第二套和第三套试管中加入1ml和0.1 ml样品。
将所有这些试管在350“在培养箱中孵育24小时。
24小时后,每个试管据说是正面推测测试的其他明智的阴性。